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MDx Platform Technologies from Bioneer

Molecular diagnostics is an integrated fusion technology of reagents and instruments.

AccuPower®
Enzyme-mediated HotStart
Dual-HotStartTM
RocketScriptTM

RocketScript™ Reverse Transcriptase (KR 10-984483)

Figure 1
Figure 1. RocketScript™ reverse transcriptase 의 구조

Protein engineering
저희는 역전사의 성능에 영향을 미치지 않고 열 안정성이 높은 RTase를 만들기 위해 천연 M-MLV의 구조와 열역학 및 응용된 다수의 point 돌연변이를 분석하였습니다. 분석 결과를 토대로 각각의 유전자의 합성 및 다양한 이형들의 발현을 통해 각각의 열 안정성과 성능을 측정하였습니다. 측정된 결과를 통해 우수한 성능을 나타내는 것을 선별하여 RocketScript™라 명명하였습니다.


문제점

RNA의 복잡한 2차 구조가 효율적 cDNA 합성 저해

해결책

고온에서 stem과 loop를 melting하여 역전사 효소의 역할 수행을 도움

Features

RNA target에 대한 민감도를 높임
Full-length cDNA 산물의 특이도를 높임

RocketScript™는 Bioneer가 합성 생물학 기술을 이용하여 독자적으로 개발한 M-MLV유래의 Thermostable Reverse Transcriptase 입니다. 저온(42℃)에서 최적 활성을 갖는M-MLV RTase는 복잡한 2차구조 (Secondary Structure)의 RNA를 효과적으로 cDNA 로 합성하는 데 많은 문제점이 있었습니다. 이런 문제점을 보완한 RocketScript™는 thermostable activity (42~70℃)를 갖고 있어 complex 구조의 RNA도 효과적으로 full-length cDNA로 합성 할 수 있습니다.

Performance

Dual-HotStart™ RT-PCR technology는 비특이 cDNA의 합성과 증폭을 이중으로 제거하여 민감도와 특이도 높은 결과를 얻을 수 있습니다.

Figure 2

Figure 2. 기존 역전사효소 (B)에 비교하여 RocketScript™ (A)는 모든 실험 온도에서 높은 안정성을 보여주고 있다. (target gene: Human Myc (495 bp)) Lane 1-4는 각각 100, 10, 1, 0.1 ng의 인간 HeLa 세포의 total RNA의 전기영동 결과.

Intellectual Property

Title Patent No. Application No. Countries
Cyclic reverse transcription method 10-984483   KR
Cyclic reverse transcription method   20100221786 US
Reverse transcriptase having improved thermostability   10-2011-0011639 KR