AccuPower® Babesia & Theileria PCR Kit

AccuPower® Babesia & Theileria PCR Kit          (제 090-009 호)

사람이나 동물(개, 고양이, 소, 양, 염소 등)의 혈액(적혈구)을 이용하여 주혈원충 감염여부를 진단하는 정성검사용 고위험성동물전염병유전검사용시약


Description
 
 바베스열원충(Babesia)과 범안열원충(Theileria)을 통칭하는 용어인 주혈원충(Piroplasma)은 사람이나 동물의 적혈구에 기생하며, 원충은 참진드기과(Family Ixodidae)에 속합니다.
 
 주로 열대와 아열대지방에서 분포하였으나, 최근 지구기온이 증가하는 지구온난화 현상에 의해 전세계적으로 확산되고 있습니다.
 
 주혈원충성 질병은 전 세계적으로 분포되어 있는 가축의 질병으로, 국내에 가장 많이 존재하는 3 숙주성 진드기에 의해 매개됩니다. 감염된 경우 평생 동안 보균가축으로 남아 전파체 역할을 하게 되므로 축산농가에 커다란 피해를 가져올 수 있습니다.
 
 비록 상기 원충에 의한 질병에 대해서 음성인 국가일지라도, 감염된 동물의 유입과 그 지역에 상재해 있는 진드기 와의 연계로 주혈원충 상재 국가(Endemicregion)가 될 수 있습니다.
 
 진드기에 물려서 사람 및 동물이 감염되어 감염 후 1∼4주가 지나면 용혈로 인한 빈혈, 피로감, 식욕감퇴, 두통, 고열, 오한 등의 증상이 나타납니다. 특히, 면역력이 약회된 동물이 감염되는 경우 치명적인 상황을 초래합니다.
 
 주혈원충의 매개체로서 국내에 분포하고 있는 진드기로는 우점종인 작은소진드기(Haemaphysalis longicornis)를 포함하여 뿔진드기(Rhipicephalus sanguineus), 꼬리소진드기(Boophilus microplus)등이 있으며 이들은 다양한 주혈원충을 매개할 수 있습니다.
 
 동물피해를 유발하는 바베스열원충은 동물종류에 따라 다양합니다. 개와 고양이에서는 Babesia canis(B. canis), B. gibsoni, B. felis, B. cati 등이 있고, 소에서는 B. bigemina, B. bovis, B. divergens, B. major등이 있으며, 양과 염소에서는 B. motasi, B. ovis, 말에서 B. caballi, 설치류와 사람에서는 B.microti 등이 있습니다.

 동물질병을 유발하는 주요 범안열원충은 동물 종류에 따라 다양합니다. 소에서는 Theileria parva(T. parva), T. annulata, T. orientalis, T. sergenti, T.taurotragi, T. velifera 등이 있습니다. 양과 염소에서는 T. hirciT. ovis, 말에서 T. equi, 사슴에서는 T. cervi등이 있습니다.
 
AccuPower® Babesia & Theileria PCR Kit
바베스열원충
(16종 )
Babesia bennetti, Babesia bigemina, Babesia capreoil, Babesia caballi, Babesia canis, Babesia crassa, Babesia conradae, Babesia divergens, Babesia gibsoni, Babesia lengau, Babesia major, Babesia motasi, Babesia occultans, Babesia odocoilei, Babesia orientalis & Babesia ovis
범안열원충
(15종)
Theileria annulata, Theileria buffeli, Theileria cervi, Theileria equi, Theileria mutans, Theileria orientalis, Theileria ovis, Theileria parva, Theileria separata, Theileria sergenti, Theileria sinensis, Theileria taurotragi, Theileria uilenbergi, Theileria velifera & Theileria youngi 
 
 
 
Features and Benefits
 
농림수산검역검사본부(QIA)와 ㈜ 바이오니아 연구진이 공동연구 개발(특허출원).
 
 세계최초 및 최고성능
16종 바베스열원충과 15종 범안열원충을 포함하는 총 31종 주혈원충을 공통(Piroplasma universal)진단 가능합니다.
 
 최적의 민감도 및 특이도
특허받은 Enzyme-mediated HotStart 기술적용으로 False positive를 최대한 배제하였습니다. 10 copies까지의 높은 민감도를 제공합니다.
 
 뛰어난 재현성
건조형식의 Hotstart PCR Premix type 으로 Template와 D.W만 첨가하므로, 재현성높은 검사결과를 제공합니다.
 
 Amplicon 오염 방지
DNA 이중나선과 공유결합을 하는 8-MOP(8-methoxypsoralen)을 첨가하여, PCR 반응물을 UV로 조사하여 Amplicon에 의한 교차오염 방지가 가능합니다.
 
 보관온도 및 안정성:
-20℃에서 2년의 유효기간을 보장합니다.
 
 품질인증:
모든 Bioneer Accupower® 제품은 ISO 9001 품질시스템하에서 제조됩니다
Specifications
Target 주혈원충 (가축기생충 - 바베스열원충, 범안열원충)
Instrument MyGenie™ 96 Gradient Thermal Block 또는 타사 Thermal Block
Specimen Whole blood
Time to result 100 mins(Post-extraction)
Tests per Kit 96
 
 
 
Experimental data

AccuPower® Babesia & Theileria PCR Kit는 최적 민감도 10 copies까지 검출할 수 있습니다.

Figure 1. AccuPower® Babesia & Theileria PCR Kit의 민감도 및 특이도 검사
(A) 민감도 검사는 양성대조군 주혈원충 Genomic DNA를 10배씩 순차희석(시료 1 ~ 5는 105 ~ 10 copies)하여 준비하였고 95℃ 5 min. 95℃ 20 sec 59℃ 50 sec (40 cycle), 72℃ 5 min조건으로 PCR 반응을 진행하였습니다. 5 μl PCR 반응산물을 2% TBE Agarose 젤에서 전기영동하였습니다.
(B) 특이도 검사는 가축(Bovine & Dog) 2종의 정상혈액내 Genomic DNA를 이용하였고, 시료 6, 7은 105 copies를 준비하였고 95℃ 5 min, 95℃ 20 sec 59℃ 50 sec(40 cycle), 72℃ 5 min 조건으로 PCR 반응을 진행하였습니다. 5 μl PCR 반응산물을 2% TBE Agarose 젤에서 전기영동하였습니다.
  
 
야생시료 476종에 대한 가축위생시험소 시험사업에 AccuPower® Babesia & Theileria PCR Kit가 특이도 실험에 사용되었습니다.
Figure 2. 야생시료 476종에 대한 AccuPower® Babesia & Theileria PCR Kit 특이도 실험(일부 예)
가축위생시험소로부터 Genomic DNA를 분양받아 특이도 실험을 시행하였습니다. Genomic DNA 2 μl를 첨가하여, 95℃ 5 min, 95℃ 20 sec 59℃ 50 sec(40 cycle), 72℃ 5 min 조건으로 PCR 반응을 진행하였습니다. 3 μl PCR 반응산물을 2% TBE Agarose 젤에서 전기영동하였습니다.
Lane 1 ~ 424: Wild type DNA (야생시료)
Lane PC1 & PC2: 양성대조군
Lane N: Negative control
Lane M: 100bp DNA Ladder(D-1030)

Cat. No. Product Description Price
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