HotStart DNA Polymerase

PCR에 필수적인 Mg2+를 Pyro-phosphate (PPi)로 불활성화시키고, 다시 PCR반응을 진행하면서 내열성 Pyro-phosphatase (PPase)에 의해 PPi를 분해하는 개념의 HotStart DNA polymerase입니다.

₩90,000
카탈로그 번호
E-3150-CFG

HotStart DNA Polymerase의 원리

Pyro-phosphate (PPi)와 pyro-phosphatase (PPase)의 화학반응을 이용한 신개념의 HotStart DNA Polymerase입니다. 
2가 양이온인 magnessium (Mg2+)은 PCR에서 중요한 역할을 합니다. Mg2+는 Pyro-phosphate (PPi)와 결합하여 complex를 형성하게 되며, Mg-PPi complex는 PCR반응을 저해하게 됩니다. PCR반응 중 내열성 Pyro-phosphatase (PPase)에 의해 Mg-PPi complex가 Mg2+와 2Pi로 분해되어 정상적인 PCR이 진행됩니다. 또한, PCR 부산물인 PPi를 2Pi로 분해하여 PCR 반응성을 증가시킬 수 있습니다.

 

특장점

  • 높은 민감도 및 특이성

    상온에서의 DNA polymerase 활성을 억제하여 PCR 반응물을 혼합하는 동안 형성될 수 있는 비특이 반응물 및 primer-dimer의 생성이 억제됩니다.

  • 수득률 향상

    높은 민감도와 특이성으로 인해 target DNA의 수득률을 향상시킬 수 있습니다.

  • 재현성

    ISO 9001 품질시스템 하에서 생산되어 각 batch에 대한 균일한 품질의 제품이 공급되기 때문에 재현성 있는 결과를 얻을 수 있습니다.

응용 및 적용

  • HotStart PCR, PCR with complex genomic templates/low copy templates/cDNA
  • Multiplex PCR
  • Primer extension
  • SNP typing
  • Real-time PCR using dsDNA Binding dye
  • Multiple primer pairs and amplification of low copy template DNA

실험 자료



Figure. Multiplex PCR comparison of genomic DNA using 6 sets of primers.

Lane M : 100 bp DNA Ladder (Bioneer, Cat. No. D-1030)

Lane 1 : 750 bp fragment

Lane 2 : 590 bp fragment

Lane 3 : 450 bp fragment

Lane 4 : 360 bp fragment

Lane 5 : 260 bp fragment

Lane 6 : 150 bp fragment

Lane 7 : Multiplex PCR with primers used for Lane 1 – 6

제품 규격/사양

5' to 3' exonuclease activity

No

3' to 5' exonuclease activity

No

3' – A overhang

Yes

Fragment size

Up to 12 kb


제품 구성

10X reaction buffer : Tris-HCl, KCl, Pyrophosphate, pH 9.0

1X dilution buffer : 50% glycerol containing 50 mM Tris-HCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, stabilizers, pH 8.2

10 mM dNTPs mix : 2.5 mM of each dNTP

• 20 mM MgCl2


농도

250 Units (5U/μl)


저장 조건

50% glycerol containing 20 mM Tris-HCl, 0.5 mM EDTA, 1 mM DTT, 100 mM KCl, stabilizers, pH 8.0


보관 온도

- 20°C


단위(Unit) 정의

One unit is defined at the amount of enzyme that will incorporate 10 nmole of dNTP into acid-insoluble material in 30 minutes at 72°C.

Manual

Manual_HotStart DNA Polymerase


MSDS

MSDS_10 mM dNTPs

MSDS_20 mM MgCl2

MSDS_10X Reaction buffer for HotStart  DNA polymerase

MSDS_Dilution buffer for HotStart DNA polymerase

MSDS_HotStart DNA polymerase


Quality Assurance

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ISO 9001 – certificate


카탈로그 번호 제품명 가격
E-3150 HotStart DNA Polymerase, 250 U, with dNTPs ₩100,000
E-3150-1 HotStart DNA Polymerase, 250 U, without dNTPs ₩90,000
E-3151 HotStart DNA Polymerase, 1000 U ₩350,000


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