Protein Synthesis

당사의 Protein Synthesis Service는 원하는 단백질을 최소 1주 이내에 공급받을 수 있는 서비스입니다. 해당 서비스는 당사의 전자동 단백질 합성 장비를 이용하여 단백질을 합성해 드리는 서비스로, 다양한 종류의 단백질 (ex)효소, 성장인자, hormone, 항원 단백질, 항체 등) 합성이 가능합니다.
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SKU
S-2500
ExiProgen™을 이용한 단백질 합성서비스의 원리는 아래와 같습니다.
목적 단백질을 발현할 수 있는 template DNA를 단백질 합성용 키트에 첨가하여, ExiProgen™ 장비에 장착하여 가동을 하면, 손쉽게 정제된 단백질을 얻을 수 있습니다.

이 때, 단백질 합성 과정은 두 단계로 진행이 되며, E. coli cell-free protein expression 반응을 통해 단백질을 발현한 후, Ni-affinity purification 반응을 통해 정제하게 됩니다. 이후 정제된 단백질은 dialysis 과정을 통해 storage buffer에 용해된 상태로 제공됩니다.



Features and Benefits

Fast process
E. coli 무세포 발현법으로 발현한 단백질을 his-tag affinity를 이용하여 정제하므로, 빠른 시간 내에 정제된 목적 단백질을 제공받으실 수 있습니다. (his-tag이 제거된 상태의 목적 단백질도 합성이 가능합니다.)

High performance
효소류, 성장인자, 호르몬, 항원 단백질, 항체 등 다양한 종류의 단백질 합성이 가능하며, 세포배양 방법으로 생산이 불가능했던 독성 단백질도 합성이 가능합니다.

Compatibility
당사의 단백질 합성 키트류를 이용하여 단백질 합성 서비스가 진행되므로, 필요한 경우 단백질을 직접 합성하실 수도 있습니다.


서비스 진행 방식

Protein Synthesis Service는 의뢰하시는 template DNA의 종류에 따라서, 다음과 같이 두 가지 방식으로 분류되어 진행됩니다.

Type I) E. coli expression vectors (ex) pET 등의 T7-based 발현 벡터)

Note) Plasmid DNA의 전체 크기에는 제한이 없으나, ORF(open reading frame)를 기준으로 0.3 kb ~ 3.5 kb의 시료만 서비스가 가능합니다.

Type II) Non-expression vectors (ex) Cloning vector/target gene)

Note) ORF(open reading frame)를 기준으로 0.3 kb ~ 1.5 kb의 시료만 서비스가 가능하며, 1.5 kb 이상의 시료는 발현벡터로 구축한 후, 의뢰하시기 바랍니다.

단백질 합성 예시

1. Normal proteins


M: AccuLadder™ Protein Size Marker (Broad)
1: RNase H (Ribonuclease H),
2: DUSP3 (Dual specific phospatase 3),
3: CAT (Chloramphenicol acetyl transferase),
4: MMLV RTase (M-MLV reverse transcriptase)
M: AccuLadder™ Protein Size Marker (Broad)
1: Calml3 (Calmoduline like protein),
2: hGH (Human Growth Hormone),
3: FGF2 (Fibroblast growth factor 2),
4: hLIF (Leukemia inhibitory factor)


2. Disulfide bonded proteins

M: AccuLadder™ Protein Size Marker (Low)
1 : ScFv (Single-chain variable fragment, 2 disulfide bonds)
2 : rPA (recombinant plasminogen activator, 9 disulfide bonds)
* rPA synthesized through disulfide bond kit has enzymatic activity.
Activity assay using chromogenic substrate S-2288.

3. Tag-free proteins

M: AccuLadder™ Protein Size Marker (Low),
1 : Expressed pBIVT-TEV-AcGFP
2 : Purified TEV-AcGFP (His-tagged)
3 : Final AcGFP (His tag-free sample)

4. Membrane proteins

M: AccuLadder™ Protein Size Marker (Low)
1 : FLAP (35 kDa)
2 : bR (43 kDa)
* FLAP (5-lipoxygenase activating protein) has 4 transmembrane domain.
* bR (bacteriorhodopsin) has 7 transmembrane domains.

MSDS

• Standard Protein Synthesis Service MSDS

Brochure

• Just for you Bioneer's Custom Services



Quality Assurance

Bioneer is the holder of Quality Management Certificates for the following standards.

• ISO 9001 – certificate

시료 제공량 E. coli expression vector1) 10 µg 이상 (A260/280 : 1.7~2.0, A260/230 : >1.5)
Non-expression vector2) 2 µg 이상
서비스 비용 60만원
Note) 단백질 합성이 되지 않을 시, data report 발송과 함께 set up charge 100,000이 청구됩니다.
서비스 결과3) 1. Data report - E-mail
2. Protein - 100 µg (0.1~1.0 mg/ml of solution form)
Storage
buffer 조성
50 mM Tris-Cl (pH7.6), 100 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.05% NaN3, 50% Glycerol
소요기간4) 7 ~ 14일
증량비용5) 10~30만원/100 µg

1) Plasmid DNA의 양 또는 순도가 조건에 부합되지 않는 경우에는 DNA 증량 서비스가 추가되며, 추가비용이 발생할 수 있습니다.
2) 일반 cloning용 vector 또는 PCR product로 의뢰가 가능하며, 이 때에는 1차 primer sets 및 template DNA 제작 서비스가 추가되어 추가비용 10만원이 발생합니다.
3) 서비스 비용은 단백질 100 µg을 합성해 드리는 비용이며, 이때 합성량은 목적 단백질의 순도와 관계없이 전체 시료의 양을 의미합니다.
4) 소요기간은 working day 기준으로 산정되며, DNA 시료 상태 또는 단백질 합성량에 따라서 증가할 수 있습니다.
5) 증량비용은 단백질 100 µg 추가 합성 시에 발생하는 비용을 의미하며, 합성 난이도에 따라서 비용이 차등 부과됩니다.


상담 안내

  • 연락처
    Tel. 042)930-8647 (단백질생산팀), E-mail; proteinorder@bioneer.co.kr
  • 상담시간
    평일 오전 9:00 ~ 오후 6:00 (주말, 휴일 휴무)
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