AccuPower® Salmonella spp. 3-Plex PCR Kit

AccuPower® Salmonella spp. 3-Plex PCR Kit (제 090-005 호)는 가축의 분변 및 회장에 감염된 살모넬라 공통유전자 (InvA)와 2종의 혈청형 S. Typhimurium (ST)와 S. Choleraesuis (SC)를 동시에 검출하는 정성검사용 고위험성 동물전염병 유전검사시약입니다.
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카탈로그 번호
MAS-1115

AccuPower® Salmonella spp. 3-Plex PCR Kit          (제 090-005 호)


사람과 가축의 분변 및 회장에 감염된 살모넬라 공통유전자 (InvA)와 2종의 혈청형 S. Typhimurium (ST)와 S. Choleraesuis (SC)를 동시에 검출하는 정성검사용 고위험성동물전염병유전검사용시약


Description
 
 살모넬라균 감염에 의한 급성 또는 만성의 소화기 전염병으로, 주로 송아지와 돼지에서 다발합니다. 그 증상으로는 발열, 위장염, 패혈증 등이 있습니다.
 
 일부 원인균은 식육을 통하여 사람에게 식중독을 유발함으로 공중보건학적으로 주요질병입니다.
 
 국내 살모넬라 발병의 대부분 원인균은 S.Typhimurium(ST)이고, 전 세계적으로는 전신패혈증을 유발하는 S. Choleraesuis(SC)가 다수 분리되고 있습니다.

구분 AccuPower® Salmonella
spp. 3-Plex PCR Kit
동물질병표준검사법
(농림수산검역검사본부)
I 사 K 사
공통 InvA + (검출) + (검출) + (검출) + (검출)


S. Choleraesuis + (검출) - (검출불가) - (검출불가) - (검출불가)
S. Typhimurium + (검출) - (검출불가) - (검출불가) - (검출불가)
비고 혈청형 감별
PreMix 건조키트
혈청형
감별불가
혈청형
감별불가
혈청형
감별불가
 
 
 
Features and Benefits
 
농림수산검역검사본부(QIA)와 (주)바이오니아 연구진이 공동연구로 개발(특허출원).
 
 신속성
살모넬라 공통유전자(InvA)와 2종의 혈청형 ST(S. Typhimurium)와 SC(S. Choleraesuis)를 단일 Tube안에서, 한 번의 2-step PCR 반응을 통해 검출하므로, Running time을 2시간 이내로 단축하였습니다.
 
 최적의 민감도 및 특이도
농림수산검역검사본부 보유 야외분리균주 111개에 대한 검증을 완료하였습니다. 특허 받은 Enzyme-mediated HotStart 기술 적용으로, 최적 민감도 1x104 CFU/ml로 맞추어 False Positive를 최대한 배재하였습니다.  
 
 뛰어난 재현성 
건조형식의 Hotstart PCR Premix type으로 Template DNA와 D.W만 첨가하므로, 재현성높은 검사결과를 제공합니다.

 Amplicon에 의한 교차오염 방지
DNA 이중나선과 공유결합을 하는 8-MOP(8-methoxypsoralen)이 첨가되어, PCR 반응물을 UV로 조사함으로써 Amplicon에 의한 교차오염 방지가 가능합니다.
 
 보관온도 및 안정성
-20℃에서 2년의 유효기간 보장.
 
 품질인증
모든 Bioneer Accupower® 제품은 ISO 9001 품질시스템하에서 제조됩니다.

Specifications

Target InvA gene(Salmonella common gene), S. Choleraesuis(SC), S. Typhimurium(ST)
Instrument MyGenie™ 96 Gradient Thermal Block 또는 타사 Thermal Block
Specimen Feces small and large intestines septicemia urine other svstemic organs
Time to result 2 hours (Post-extraction)
Tests per Kit 96

 
 
 
Experimental data
 
살모넬라 공통유전자(InvA)와 2종의 혈청형S. Choleraesuis(SC) & S. Typhimurium(ST)을 동시에 검출합니다.

Figure 1. AccuPower® Salmonella spp. 3-Plex PCR Kit 성능실험
AccuPower®Salmonella spp. 3-Plex PCR Kit를 이용하여, 총 3 ng의 Genomic DNA[균주 ATCC 7001(S. Choleraesuis), ATCC 14028(S. Typhimurium)각 2 ng]를 95℃ 5 min, 95℃ 30 sec 65℃ 1 min 30 sec(30 cycles), 72℃ 5 min 조건으로 PCR 반응을 진행하였습니다. 3 μl PCR 반응산물을 2% TBE Agarose 젤에서 전기영동하였습니다.
Lane 1: S.Typhimurium genomic DNA
Lane 2: S. Choleraesuis genomic DNA
Lane 3: S. Typhimurium & Choleraesuis genomic DNA
Lane 4: S. Enteritidis genomic DNA
Lane M: 100 bp DNA Ladder (D-1030)
Lane N: Negative control
 


QIA의 동물질병표준검사법과 타사제품은 혈청형을 구분할 수 없으나, AccuPower® Salmonella spp. 3-Plex PCR Kit 는 공통유전자와 2종의 혈청형 (SC & ST)을 구분할 수 있습니다.

Figure 2. 타사제품 및 QIA의 동물질병표준검사법과의 PCR성능 비교실험
AccuPower® Salmonella spp. 3-Plex PCR Kit와 QIA의 동물질병표준검사법, 국내  K사 키트 그리고 국내 I사 키트를 이용하여, 총 4 ng의 Genomic DNA(균주 ST, SC각 2 ng)를 각각의 권장 조건으로 PCR 반응을 진행하였습니다 [1 : 95℃ 5 min, 95℃ 30 sec 65℃ 1 min 30 sec(30 cycles), 72℃ 5 min, 2: 95℃ 5 min, 94℃ 1 min 54℃ 30sec 72℃ 30sec(35 cycles), 72℃ 10 min, 3: 95℃ 12 min, 94℃ 30 sec 58℃ 1 min 72℃ 1 min(35 cycles), 72℃ 10 min,4: 94℃ 5 min, 94℃ 30 sec 50℃ 30 sec 72℃ 40 sec(40 cycles), 72℃ 5 min]. 3 μl PCR 반응산물을 2% TBE Agarose 젤에서 전기영동하였습니다.
Lane 1: AccuPower® Salmonellaspp. 3-Plex PCR Kit
Lane 2: QIA의 동물질병표준검사법
Lane 3: 국내 K사 키트
Lane 4: 국내 I사 키트
Lane M: 100 bp DNA Ladder (D-1030)
Lane N: Negative control
 


최적의 민감도 1X104 CFU/ml 까지 검출할 수 있습니다.

Figure 3. AccuPower® Salmonella spp. 3-Plex PCR Kit에 대한 민감도실험
총 4 ng의 Genomic DNA(균주 ST, SC각 2 ng)를 95℃ 5 min, 95℃ 30 sec 65℃ 1 min 30 sec (30cycles), 72℃ 5 min 조건으로 PCR 반응을 진행하였습니다. 3 μl PCR 반응산물을 2% TBE 젤에서 전기영동하였습니다.
Lane 1: 1X108 CFU/ml
Lane 2: 1X107 CFU/ml
Lane 3: 1X106 CFU/ml,
Lane 4: 1X105 CFU/ml
Lane 5: 1X104 CFU/ml
Lane 6: 1X103 CFU/ml
Lane 7: 1X102 CFU/ml
Lane M: 100 bp DNA Ladder (D-1030)
Lane N: Negative control
 


야생시료 15종에 대한 특이도실험에서, QIA의 동물질병표준검사법과 타사제품들은 혈청형을 구분할 수 없습니다. AccuPower® Salmonella spp. 3-Plex PCR Kit만 InvA와 2종의 혈청형(SC, ST) 모두를 검출합니다.

Figure 4. 야생시료 15종에 대한 타사제품 및 QIA의 동물질병표준검사법과의 특이도 비교실험
AccuPower® Salmonella spp. 3-Plex PCR Kit와 QIA의 동물질병표준검사법 그리고 국내 I사와 K사 키트를 이용하여, Genomic DNA 4 ng을 각각의 권장조건으로 PCR 반응을 진행하였습니다[ I: 95℃ 5 min, 95℃ 30 sec 65℃ 1 min 30 sec(30 cycles), 72℃ 5 min, II: 95℃ 5 min, 94℃ 1 min 54℃ 30 sec 72℃ 30 sec(35 cycles), 72℃ 10 min, III: 94℃ 5 min, 94℃ 30 sec 50℃ 30 sec 72℃ 40 sec(40 cycles), 72℃ 5 min, IV: 95℃ 12 min, 94℃ 30 sec 63℃ 30 sec 72℃ 30 sec(35 cycles), 72℃ 10 min]. PCR 반응산물 3 μl를 2% TBE Agarose 젤에서 전기영동하였습니다.
Lane 1: Wild -type S. enteritidis
Lane 2: Wild -type S. Rissen
Lane 3: Wild -type S. enteritidis
Lane 4: Wild -type S. Montevideo
Lane 5: Wild -type S. Schwarzengrund
Lane 6 ~ 12: Wild -type S. Typhimurium
Lane 13: Wild -type S. Cholerasuis
Lane 14: Wild -type S. Gallinarum
Lane 15: Wild -type S. Derby
Lane M: 100bp DNA Ladder (D-1030)
Lane N: Negative control
 


장내유사세균 15종에 대한 특이도 실험에서, QIA의 동물질병표준검사법과 타사제품은 비특이반응으로 특이도가 낮습니다. AccuPower® Salmonella spp. 3-Plex PCR Kit만 비특이 반응없이, 위양성 검증을 완료하였습니다.

Figure 5. 장내 유사세균 15종에 대한 각 제품별 특이도 실험
다양한 장내유사세균 유래 Genomic DNA 4ng을 AccuPower® Salmonella spp. 3-Plex PCR Kit, QIA의 동물질병표준검사법 그리고 국내 K사 키트를 각각의 권장조건으로 PCR 반응을 진행하였습니다 [ I: 95℃ 5 min, 95℃ 30 sec 65℃ 1 min 30 sec(30 cycles), 72℃ 5 min, II: 95℃ 5 min, 94℃ 1 min 54℃ 30 sec 72℃ 30 sec(35 cycles), 72℃ 10 min, III: 95℃ 12 min, 94℃ 30 sec 63℃ 30 sec 72℃ 30 sec(35cycles), 72℃ 10 min]. 3 μl PCR 반응산물을 2% TBE Agarose 젤에서 전기영동하였습니다.
Lane 1 : Acinetobacter lwoffii genomic DNA
Lane 2 : Enterococcus fecalis genomic DNA
Lane 3: Maltophilia genomic DNA
Lane 4: Pseudomonas putida genomic DNA
Lane 5: Proteus mirabilis genomic DNA
Lane 6: Citrobacter freundii genomic DNA
Lane 7: Klebsiella pneumonia sub. genomic DNA
Lane 8: Enterobacter cloacae genomic DNA
Lane 9: Acinetobacter haemolyticus genomic DNA
Lane 10: Comamonas testosterone genomic DNA
Lane 11: Clostridium perfrigens alpha genomic DNA
Lane 12: Burkholderia cepacia genomic DNA
Lane 13: Ochrobactrum anthropi genomic DNA
Lane 14: Serratia marcescens genomic DNA
Lane 15: Acinetobacter junii genomic DNA
Lane M : 100 bp DNA Ladder (D-1030)
Lane N : Negative control

Manual

• Manual_AccuPower® Salmonella spp. 3-plex PCR Kit


MSDS

AccuPower® Salmonella spp. 3-Plex PCR Kit


Brochure

AccuPower® Veterinary Diagnostic PCR Kit - Brochure


Quality Assurance

Bioneer is the holder of Quality Management System Certificates for the following standards.


ISO 9001 – certificate

EN ISO 13485 - certificate

EC Directive 98/79/EC - certificate


Cat. No. Product Description Price
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