AccuPower® Porcine Respiratory 4-Plex PCR Kit

돼지 세균성호흡기질병원인체 4종 Actinobacillus pleuropneumoniae (App), Actinobacillus suis (A. suis), Haemophilus parasuis (H. parasuis) 그리고 Streptococcus suis (S. suis)를 동시에 검출하는 정성검사용 유전검사용시약 (RUO)

₩350,000
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SKU
MPR-1115
Description
 
 돼지의 세균성호흡기질병은 전 세계적으로 발생하는 질병입니다. 환기불량과 온도변화 등의 스트레스인자이며, 바이러스 감염 후 2차 감염을 통해 호흡기질병을 악화시키고, 동물의 폐사 및 생산성 감소를 유발하여, 농장에 상당한 경제적 피해를 줍니다. 대표적 원인균으로 Actinobacillus pleuropneumoniae (App), Actinobacillus suis (A. suis), Haemophilus parasuis (H. parasuis), Streptococcus suis (S. suis)가 있습니다.
 
 Actinobacillus pleuropneumoniae (App)는 흉막폐렴의 원인체로, 육성 및 비육돈에 다발하여 급사를 일으킵니다. 현재 15종의 혈청형이 존재하는 것으로 알려져 있으나, 국내에는 일반적으로 2형과 5형이 분리되고 있습니다.
 
 Actinobacillus suis (A. suis)는 돼지의 편도, 비강 및 질 등에 상재하다가 개체의 면역수준이나 사양관리 상태가 악화되면 자돈에서 급성 패혈증, 성돈에서는 폐렴, 관절염, 유산과 돈 단독 유사 피부병변 등 다양한 병증을 유발합니다.
 
 Haemophilus parasuis (H. parasuis)는 글래서씨병의 원인체로써 호흡기 폐렴뿐만 아니라 전신성 다발성장막염을 일으킵니다. 주로 육성돈에 발증되어 재채기, 식욕부진, 고열, 침울, 체중손실, 관절종창 및 결막염 등의 병변을 발생합니다. 만성으로 진행시, 폐사율은 10-50%까지 보고되어있습니다.
 
Streptococcus suis (S. suis) 감염증은 Streptococcus spp.중에서 가장 빈번하게 돼지의 호흡기성 질병을 일으키며, 폐렴을 유발하거나 뇌막염, 관절염 그리고 기관지염 등 다양한 질병을 유발합니다.
 
  AccuPower® Porcine Respiratory
4-Plex PCR Kit
동물질병표준검사법
(QIA)
A사 (France) B사 (Chile)
App + (4종 동시검출) + (단독검사) + (단독검사) + (단독검사)
A. suis - (검출불가) - (검출불가) - (검출불가)
H. parasuis + (단독검사) - (검출불가) + (단독검사)
S. suis + (단독검사) - (검출불가) - (검출불가)
비고 검출한계: 1 x 104 CFU/ml
PreMix 건조 키트
단독(Single) PCR,
Solution Mix
 
 
 
Features and Benefits

농림수산검역검사본부 (QIA)와 (주)바이오니아 연구진이 공동연구 개발 (특허출원)

 신속성
돼지 호흡기세균질병원인체 4종 Actinobacillus pleuropneumoniae (App), Actinobacillus suis (A. suis), Haemophilus parasuis (H. parasuis) 그리고 Streptococcus suis (S. suis)를 단일 Tube안에서, 한번의 2-step PCR 반응을 통해 검출함으로, Running time을 2시간 이내로 단축하였습니다.

 최적의 민감도 및 특이도
농림수산검역검사본부 (QIA) 보유 야외균리균주 143개에대한 검증완료. 특허 받은 Enzyme-mediated HotStart 기술 적용으로, 최적민감도를 1 x 104 CFU/ml로 맞추어 False Positive를 최대한 배제하였습니다.

 뛰어난 재현성
건조형식의 HotStart PCR PreMix type 으로 Template DNA와 증류수만 첨가하여 재현성 높은 검사결과를 제공합니다.

 Amplicon에 의한 교차오염 방지
DNA 이중나선과 공유결합을 하는 8-MOP (8-methoxypsoralen)이 첨가되어, PCR 반응물을 UV로 조사함으로써 Amplicon에 의한 교차오염 방지가 가능합니다.

 보관온도 및 안정성
-20℃에서 2년의 유효기간을 보장합니다.

 품질인증
모든 Bioneer AccuPower® 제품은 ISO 9001 품질시스템하에서 제조됩니다.

Specifications
 
Target Actinobacillus pleuropneumoniae (App), Actinobacillus suis (A. suis), Haemophilus parasuis (H. parasuis), Streptococcus suis (S. suis)
Instrument MyGenie™ 96 Gradient Thermal Block 또는 타사 Thermal Block
Specimen Brain, bronchus, joint , lung, peritoneum, pleura, tonsil, other organs
Time to result 2 hours (Post-extraction)
Tests per Kit 96
 
 
 
Experimental data
 
돼지 호흡기질병을 유발하는 4종 (App, A. suis, H. parasuis & S. suis)을 동시에 검출합니다.

Figure 1. AccuPower® Porcine Respiratory 4-Plex PCR Kit 성능 실험
AccuPower®Porcine Respiratory 4-Plex PCR Kit를 이용하여, 총 4 ng의 Genomic DNA mixture를 95℃ 5 min, 95℃ 30 sec 65℃ 1 min 30 sec(30 cycles), 72℃ 5 min의 조건으로 PCR 반응을 진행하였습니다. 3 μl PCR 반응산물을 2% TBE Agarose 젤에서 전기영동하였습니다.
Lane 1: A.suis, App, H. parasuis & S.suis genomic DNA mixture (총 4 ng)
Lane N: Negative control,
Lane M: 100bp DNA Ladder (D-1030)
 
야외시료 30주에 대한 특이도 비교실험에서, QIA의 동물질병표준검사법은 각각 단독반응에서만 확인할 수 있으나 AccuPower® Porcine Respiratory 4-Plex PCR Kit는 한 번에 App, A. suis, H. parasuis & S. suis 모두를 정확히 확인하였습니다.

Figure 2. 야외시료에 대한 QIA의 각각의 동물질병표준 검사법들과의 특이도 비교실험
야외시료 30주에서 추출한 2 ng의 Genomic DNA를 각각의 권장검사조건으로 PCR 반응을 진행하였습니다.
[ I: 95℃ 5 min, 95℃ 30 sec 65℃ 1 min 30 sec(30 cycles), 72℃ 5 min, II : 95℃ 15 min, 94℃ 30 sec 59℃ 30 sec 72℃ 2 min(30 cycles), 72℃ 10 min, III: 94℃ 10 min, 95℃ 30 sec 52℃ 30 sec 72℃ 30 sec(35 cycles), 72℃ 10 min, IV : 94℃ 5 min, 94℃ 1 min 55℃ 1 min 72℃ 1 min(35 cycles), 72℃ 7 min].  3 μl PCR 반응산물을 2% TBE 젤에서 전기영동하였습니다.
Lane 1~24: Wild-type DNA (야생시료, 농림수산검역검사본부),
Lane N: Negative control,
Lane M: 100bp DNA Ladder (D-1030)
 
장내유사 세균 15종에 대한 특이도 실험에서, 비특이 반응없는 높은 특이도 결과로 위양성 검증을 완료 했습니다.

Figure 3. 장내 유사세균 15종에 대한 AccuPower® Porcine Respiratory 4-Plex PCR Kit
다양한 장내유사세균 유래의 총 2 ng Genomic DNA를 AccuPower® Porcine Respiratory 4-Plex PCR Kit 를 이용하여, 95℃ 5 min., 95℃ 30 sec. 65℃ 1 min 30 sec(30 cycles), 72℃ 5 min 의 조건으로 PCR 반응을 진행하였습니다. 3 μl PCR 반응산물을 2% TBE Agarose 젤에서 전기영동하였습니다.
Lane 1: Acinetobacter lwoffii
Lane 2: Enterococcus fecalis
Lane 3: Maltophilia
Lane 4: Pseudomonas putida
Lane 5: Proteus mirabilis
Lane 6: Citrobacter freundii
Lane 7: Klebsiella pneumonia sub
Lane 8: Enterobacter cloacae
Lane 9: Acinetobacter haemolyticus
Lane 10: Comamonas testosterone
Lane 11: Clostridium perfrigens alpha
Lane 12: Burkholderia cepacia
Lane 13: Ochrobactrum anthropi
Lane 14: Serratia marcescens
Lane 15: Acinetobacter junii
Lane N: Negative control
Lane M: 100bp DNA Ladder (D-1030),
 
최적의 민감도 4x104 CFU/ml까지 검출합니다.
Figure 4. AccuPower® Porcine Respiratory 4-Plex PCR Kit 민감도실험
Drop plate method에 따른 CFU/ml 측정 후, 95℃ 5 min, 95℃ 30 sec 65℃ 1 min 30 sec(30 cycles), 72℃ 5 min으로 PCR 반응을 진행하였습니. 3 μl PCR 반응산물을 2% TBE Agarose 젤에서 전기영동하였습니다.
Lane 1: 4 x 108 CFU/ml
Lane 2: 4 x 107 CFU/ml
Lane 3: 4 x 106 CFU/ml
Lane 4: 4 x 105 CFU/ml
Lane 5: 4 x 104 CFU/ml
Lane 6: 4 x 103 CFU/ml
Lane 7: 4 x 102 CFU/ml
Lane N: Negative control
Lane M: 100bp DNA Ladder (D-1030)
 

Manual

• Manual_AccuPower® Porcin Respiratory 4-plex PCR Kit


MSDS

AccuPower® Porcine Respiratory 4-Plex PCR Kit


Brochure

AccuPower® Veterinary Diagnostic PCR Kit - Brochure


Quality Assurance

Bioneer is the holder of Quality Management System Certificates for the following standards.


ISO 9001 – certificate

EN ISO 13485 - certificate

EC Directive 98/79/EC - certificate


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