Plasmid형태의 Cas9과 gRNA를 target cell에 처리하고, 편집된 gDNA의 편집효율 data와 Knock-out된 cell pool이 제공되는 서비스입니다.
개요
CRISPR-Cas9 system을 이용한 genome editing은 간단하고 효율적인 방법이지만, cell 형태 및 종류에 따라 Cas9 과 gRNA 최적비율을 screening 해야 하고, 높은 효율의 편집을 위한 Transfection 방법의 최적화 등 프로토콜 최적화에 많은 시간이 투입되어야 합니다.
고객이 제공한 cell에 편집하고자 하는 target gRNA가 처리된 Knock-out Cell Pool 과, 편집 효율 data까지 제공하여, 많은 시간, 비용 그리고 노력이 필요한 과정을 대신 실행해드립니다.
편집 효율은 여러가지 요소에 의해 달라질 수 있습니다 (gRNA sequence, Plasmid 상태, Transfection 조건 등). 본 서비스에서는 Positive control (Human CCR5, Human HPRT1)의 편집효율 40% 이상을 기준하여, 같은 실험 조건을 고객 sample에 적용하고 편집효율 분석을 진행합니다.
Transfected cells 서비스는 요청하신 sequence대로 gRNA를 합성하고 해당 실험에 맞는 transfection 방법의 최적화, 편집효율 검증으로 구성된 엄격한 세포 편집 프로세스를 거칩니다. 해당 서비스를 이용하시면 guide RNA 합성과 최적화 된 CRISPR 조건을 찾는 비용 및 시간을 절약하여 이후 실험에 집중할 수 있는 여유를 얻을 수 있습니다.
해당 서비스를 통해 제공받은 cell pool은 추후 실험에 직접 사용하거나, single cell로 분리하여 연구에 이용할 수 있습니다.
특장점
- 시간 및 비용 절감
최적의 CRISPR 프로토콜을 찾기 위한 단계에 소요되는 비용 및 시간을 절감할 수 있습니다.
- 높은 효율의 Editing
경험과 노하우를 통해 고효율의 편집결과를 확보할 수 있습니다.
- 원하는 편집 유전자를 빠르게 확보
편집된 유전자 형태 및 비율을 확인하고, 해당 cell pool을 이용하여 추가 실험 진행할 수 있습니다.
▶ 작업 순서
1주문
AccuTool™ Transfected Cell Service Order Form, 유전자변형 활용계획서를 작성하시어 서비스에 사용될 cell의 Mycoplasma test 결과와 함께 crispr@bioneer.co.kr 로 보내주세요.
주문 접수 후, 서비스 가능한 형태의 cell을 보내주시면 서비스가 시작됩니다.
Figure 1. Workflow of Transfected Cell Service
2실험 진행
2-1. 입력해 주신 Guide RNA를 합성합니다.
2-2. 합성된 Guide RNA와 Cas9 Plasmid를 고객 cell에 도입합니다. (Positive control 함께 실행)
2-3. Knock-out cell pool에서 genomic DNA를 추출합니다.
2-4. 추출한 genomic DNA의 editing 결과를 확인합니다.
2-5. Positive control 기준 40% 이상의 편집효율이 나오는 조건으로 cell pool을 제작합니다.
3제품 배송
1X106 cells/1ml_2 vials (Knock-out cell pool)과 sgRNA (plasmid DNA form, 2 µg)를 제공하고 Transfection efficiency test 결과와 편집효율 data가 포함된 report를 전달해 드립니다.
▶ 제품 규격/사양
| 카탈로그 번호 |
제품명 |
구성품 |
| ATC-0130 |
AccuTool™ Transfected Cells |
1X106 cells/1 ml_2 vials (Knock-out cell pool),
sgRNA (plasmid DNA form, 2 µg),
Data sheet |
보장내역:
*Mycoplasma Test가 완료된 Human adherent cell만 서비스 가능 합니다.
*서비스를 시작하기에 앞서, 보내주신 cell의 Mycoplasma Test를 추가로 진행하고 Control로 사용될 CCR5 또는 HPRT1 gene의 유무를 확인합니다. 두 단계를 통과하지 못할 경우, 서비스 진행 불가합니다.
*원하시는 gRNA를 합성하고 Plasmid DNA 형태의 Cas9과 sgRNA를 고객 cell에 Transfection하여 확보된 gene editing이 된 cell pool을 전달해 드리는 서비스입니다.
*Knock-out cell pool과 사용된 sgRNA (Plasmid DNA 형태, 2 µg), 그리고 Transfection efficiency test 결과와 편집효율 data를 전달해 드립니다.
*고객에게 제공받은 cell에 Positive control (Human CCR5, Human HPRT1) 기준 40% 이상 편집효율이 발생한 조건으로 실험 진행하며, 고객이 입력해 준 gRNA의 편집효율을 보장하지 않습니다.
*높은 효율의 gRNA를 screening해 드리는 서비스가 아닙니다. gRNA screening은 gRNA Validation service를 참고해 주십시오.
◈ Manual
◈ MSDS
◈ Brochure
◈ Quality Assurance
Bioneer is the holder of Quality Management System Certificates for the following standards.
▶ 구성품
| AccuTool™ Transfected Cells |
| 카탈로그 번호 |
ATC-0130 |
| 서비스 가격 |
₩ATC-0130 |
| 서비스 기간 |
8 weeks |
| Delivery Form |
Cell pool (Dry ice) |
*
주문 취소 규정: 주문 후 취소 불가능
▶ 샘플 준비 조건 및 서비스 이용 방법
- Mycoplasma test가 완료된 Human adherent cell을 대상으로 서비스 진행합니다.
- “Mycoplasma test결과”, “서비스 order form”과 “유전자변형생물체 활용계획서”를 작성하여 crispr@bioneer.co.kr 로 보내주시고, 서비스 가능한 형태의 cell을 보내주세요.
- Cell은 5X106 cells/ml, Vol. 1 ml 이상을 Cryo tube에 담아 보내주셔야 합니다.
- 서비스를 시작하기에 앞서, 보내주신 cell의 Mycoplasma Test를 추가로 진행하고 Control로 사용될 CCR5 또는 HPRT1 gene의 유무를 확인합니다. 두 단계를 통과하지 못할 경우, 서비스 진행 불가합니다.
- Mycoplasma Test 결과 서비스 진행이 불가 시, Set-up charge 비용이 부과됩니다.
▶ 샘플 배송
샘플은 cryo tube에 담아 sealing 후, 샘플 팩에 담아 동봉합니다.
배송 중 degradation이 되지 않도록 충분한 드라이아이스를 동봉하며, 파손에 유의하여 완충재를 넣어 배송합니다.
- 박스에 소속기관과 의뢰자명을 정확히 기입하시고, 아래 연계 배송회사를 통하여 sample을 배송해 주세요.
- 당사 연계 택배회사 (롯데택배 1588-2121)
- 보내실 곳: 대전시 대덕구 문평서로 8-11 ㈜바이오니아 합성생물학그룹
- 운송비: template 개수에 상관없이 당사부담
(단, 연계 택배회사 외에 다른 택배 이용 시 운송비는 고객께서 부담하셔야 합니다.)
주의!
- 충분한 양의 드라이아이스로 냉동상태를 유지하도록 포장해 주시고, 익일 도착이 가능한지 확인 후 발송 부탁드립니다.
(배송지연에 의한 샘플 변성 방지를 위해 금요일 또는 공휴일 전날 배송은 삼가주시기 바랍니다. 배송과정에서 발생한 문제는 책임지지 않습니다.)
▶ 상담 안내
- 제품 상담: Tel. 1588-9788(고객지원센터) 문의해 주시거나, crispr@bioneer.co.kr 로 이메일을 보내주세요.
- 상담시간: 평일 오전 9:00 ~ 오후 6:00 (주말, 휴일 휴무)
