AccuRapid™ Protein Expression kit

AccuRapid™ Protein Expression Kit는 반응튜브 내에서 template DNA를 이용하여 3시간 만에 원하는 단백질의 발현을 확인할 수 있는 kit로서 E. coli extract와 Master Mix를 포함하고 있습니다. E. coli extract는 T7 RNA polymerase, ribosome등이 포함되어 있고, Master Mix에는 아미노산, NTPs, 에너지원등이 포함되어 template DNA만 준비되어 있으면 손쉽게 목적 단백질의 발현을 확인할 수 있습니다. 

₩150,000
In stock
SKU
K-7250-CFG

Features and Benefits

High Speed
3시간 만에 DNA로부터 단백질을 발현할 수 있습니다.

Flexibility
T7 promoter/terminator site와 RBS (Ribosomal Binding Site)를 포함하고 있는 다양한 template DNA로부터 원하는 단백질의 발현이 가능합니다.

High Performance
기존의 cloning 방법으로 발현이 불가능했던 host 세포에 독성을 나타내는 단백질의 발현이 가능합니다.

Compatibility
본 kit는 ExiProgen™ 단백질 합성 kit류와 호환이 가능하며, template DNA의 최적 농도를 찾는데 사용할 수 있습니다.


Principle of Cell-Free Protein expression system

본 제품은 T7 expression system을 기반으로 하며, 실험 방법과 원리는 다음과 같습니다.
미리 준비한 template DNA(발현벡터 또는 PCR product)를 키트에서 제공하는 E. coli extract, Master mix와 혼합한 후, PCR machine 또는 Water bath에 넣고, 30℃에서 3시간 동안 반응을 시킵니다.
이 과정에서 E. coli extract와 Master mix로부터 공급되는 T7 RNA polymerase, ribosome, tRNAs, amino acids, energy source등을 이용하여, coupled transcription-translation 반응이 일어나게 되며, template DNA로부터 원하는 목적 단백질이 발현되게 됩니다.

figure1

Kit Contents

제품명 AccuRapid™ Cell-Free
Protein Expression Kit
AccuRapid™ Midi
Protein Expression Kit
AccuRapid™ Maxi
Protein Expression Kit
제품번호 K-7250 K-7260 K-7270
구성품 Master mix 0.54 ml × 1 tube 1.2 ml × 2 tube 4.8 ml × 1 bottle
E.coli extract 0.3 ml × 1 tube 0.28 ml × 5 tubes 2.8 ml × 1 bottle
DEPC D.W. 1 ml × 1 tube 1 ml × 2 tubes 3 ml × 1 bottle
Positive Control DNA 1 tube 1 tube 1 tube

Storage conditions

-20℃ ~ -70℃에 보관 (E.coli extract ;  -70℃)

Experimental Data

1. AccuRapid™ Protein Expression Kits를 이용한AcGFP 단백질 (Positive Control) 발현

figure1

Figure 1. Positive control protein expression data of AccuRapid™ Protein Expression kits
(SDS-PAGE and Coomassie Brilliant Blue staining)

M ; AccuLadder™ Protein size marker (Low) (Cat. No. D-2020, Bioneer),
1,3,5 ; Negative control(No-DNA), 2,4,6 ; Positive control (pBIVT-AcGFP)
Note) K-7250 - 45 μl rxn, K-7260 – 1 ml rxn, K-7270-10 ml rxn

2. 다양한 단백질의 발현

figure2

Figure 2. Various protein expression data (SDS-PAGE and Coomassie Brilliant Blue staining)
M ; AccuLadder™ Protein size marker (Low) (Cat. No. D-2020, Bioneer),
1,3,5 ; Negative control(No-DNA), 2; CAT (Chloramphenicol acetyl transferase), 4; GFP (Green fluorescence protein),
6; PTP1B(Protein tyrosine phosphatase 1B)

3. Template DNA의 최적 DNA 농도 screening

figure3

Figure 3. Determination of the optimal amount of template DNA for the expression of pBIVT-GFP.
(SDS-PAGE and Coomassie Brilliant Blue staining)

M ; AccuLadder™ Protein size marker (Low) (Cat. No. D-2020, Bioneer),
1; Negative Control(No-DNA), 2 ; CAT (Chloramphenicol acetyl transferase),
3 ~9; pBIVT-GFP(50, 100, 200, 400, 600, 800(ng))


Cat. No. Product Description Price
K-7250 AccuRapid™ Cell-Free Protein Expression kit, 24 rxn ₩150,000
K-7260 AccuRapid™ Midi Protein Expression kit, 1 ml x 5 rxn ₩490,000
K-7270 AccuRapid™ Maxi Protein Expression Kit, 10 ml x 1 rxn ₩990,000

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