AccuPower® Gold Multiplex PCR PreMix

AccuPower® Gold Multiplex PCR PreMix는 한 tube 내에서 한 번 반응으로 20개의 target gene의 PCR 산물을 얻을 수 있는 제품입니다. 바이오니아의 enzyme-mediated HotStart 특허기술을 적용하여 DNA polymerase가 낮은 온도에서 반응하면서 발생할 수 있는 mis-priming, primer-dimer와 같은 비특이 반응을 줄여줍니다. 본 제품은 multiplex PCR 기술을 이용한 genotyping assay나 유전자 진단 등 다양한 분야의 실험에 적합합니다.

₩86,000
카탈로그 번호
K-2115-CFG

Features and Benefits

Multiplex PCR:
한 tube 내에서 20개의 multiplex PCR 증폭산물 생성할 수 있습니다.

Specificity: 
PyroHotStart 기술을 적용하여 비특이 증폭산물 생성을 최소화하고, PCR 반응 효율을 극대화 함으로써 미량의 template DNA를 효과적으로 증폭할 수 있습니다. PyroHotStart 기술은 pyrophosphate와 pyrophosphatase 효소를 이용하여, PCR 반응을 시작하기 전 (zero cycle)에 발생하는 비특이적 반응을 줄여 특이도를 높인 바이오니아 고유의 특허기술입니다. 뿐만 아니라 매 증폭 cycle시 발생하여 PCR 저해물질로 작용하는 PPi를 제거함으로써 반응 효율을 높입니다.

(a) Zero cycle에서 PCR 반응 억제: PCR mixture 제조 후, pre-denaturation 온도에 도달하기 전에 비특이적 반응물이 생성되는 것을 방지하기 위해 PPi를 이용합니다. DNA polymerase가 활성을 갖기 위해서는 Mg2+ 이온이 필요한데, mixture에 첨가되어 있는 PPi는 Mg2+ 이온과 높은 친화력을 갖기 때문에 Mg2+ 이온을 붙잡아 둠으로써 PCR 반응을 억제합니다.
(b) Denaturation: Mixture에 첨가되어 있는 PPase는 denaturation 단계에서 반응 온도가 올라가면 활성화되어 PPi를 Pi로 분해하여 Mg2+ 이온을 해리시킵니다. 해리된 Mg2+ 이온은 DNA polymerase에 결합하여 PCR 반응을 진행할 수 있도록 enzyme을 활성화 합니다.
(c) Annealing & Extension: 활성화된 DNA polymerase는 PCR cycle이 진행됨에 따라 target DNA를 증폭합니다.

Ease-of-Use:
각각의 PCR tube에 Top DNA polymerase와 PCR 수행에 필요한 모든 구성 성분이 포함되어 있어 template DNA, primer set, D.W.만 넣어 바로 multiplex PCR 반응을 수행할 수 있습니다. 또한 전기 영동 시에 필요한 tracking dye와 침강제가 포함되어 있어 sample loading buffer를 추가로 넣을 필요가 없으므로 간편하게 사용할 수 있습니다.

Stability: 
PCR 반응 혼합물에 안정화제를 첨가하여 건조시켜, 장기간 보관하더라도 활성을 안정적으로 유지합니다.

Reproducibility:
ISO 9001 품질 시스템 하에서 one-batch system으로 대량 생산되어 각 batch에 대한 철저한 QC를 거친 후 균일한 품질의 제품으로 공급되기 때문에 사용자가 대량의 시료를 반복적으로 처리할 때 각 tube마다 발생하는 편차 문제를 해결하여 재현성있는 실험 결과를 제공합니다.


Specifications

Enzyme: Top DNA polymerase
5' to 3' exonuclease: No
3' to 5' exonuclease: No
3' – A overhang: Yes
Fragment Size: Up to 1 kb


Applications

Target Application
Human and Animal
  STR analysis for determining genetic profiles in forensic cases
  Molecular diagnostic analysis
  Genotyping assay
  Qualitative and semi-qualitative gene expression assay
  Mutant screening
  Transgenic organism analysis
Plant
  STR analysis
  Detection of pathogens/bacterial infection
  Transgenic organism analysis
  Qualitative and semi-qualitative gene expression assay

Experimental data

Gold Multiplex PCR PreMix figure2

Figure 1. High specificity of AccuPower® Gold Multiplex PCR PreMix
Each lane from left to right represensts the progressive number of primer sets (1 – 20) included in single AccuPower® Gold Multiplex PCR PreMix reactions.
Rxn. Condition : 95°C for 10 min, followed by 30 cycles(a), 35 cycles(b) of 30 sec at 95°C, 30 sec at 57°C, 60 sec at 72°C
M; 25/100 bp Mixed DNA Ladder (Cat. No. D-1020, Bioneer)



Gold Multiplex PCR PreMix figure1

Figure 2. Single PCR and Multiplex PCR using AccuPower® Gold Multiplex PCR PreMix
Each lane from left to right indicates the single and multiplex PCR products using AccuPower® Gold Multiplex PCR PreMix. The last lane labeled multi represents all amplicons amplified in a single reaction.
a) 10 plex multiplex PCR, b) 20 plex multiplex PCR M; 25/100 bp Mixed DNA Ladder (cat. No. D-1020, Bioneer)



Gold Multiplex PCR PreMix figure4

Figure 3. Comparison of amplification quality, using a Caliper Labchip® 90 system, between AccuPower® Gold Multiplex PCR PreMix and competitor Multiplex PCR kits.
a) Virtual Gel Image. Gel image illustrates data reproducibility of the Caliper LabChip® 90 system.
b) Overlay of expression levels using Bioneer's AccuPower® Gold Multiplex PCR PreMix and competitor multiplex PCR kits. The electropherogram displays the data between 10 PCR product yields using a 10-plex primer set to illustrate amplification efficiency.
c) The graph shows the total concentration of PCR products between AccuPower® Gold Multiplex PCR PreMix and other supplier's master mix.


Gold Multiplex PCR PreMix figure3

Figure 4. Comparison of amplification quality between AccuPower® Gold Multiplex PCR PreMix and competitor Multiplex PCR kits.
6-plex (a), 10-plex (b), 20-plex (c) primers were added into AccuPower® Gold Multiplex PCR PreMix and competitor master mix. A series of human genomic DNA diluents were tested (Lane 1; 100 ng, Lane 2; 10 ng, Lane 3; 1 ng).
All data were obtained using Mygenie 96 machine (Applied Bioneer co.)
Supplier Q : Multiplex PCR master mix, Supplier S : Multiplex PCR master mix, Supplier I : Taq polymerase for Mutiplex PCR (0.5U), added 2mM MgCl2
M; 25/100 bp Mixed DNA Ladder (cat. No. D-1020, Bioneer)


Cat. No. Product Description Price
K-2115 AccuPower® Gold Multiplex PCR PreMix, 0.2ml thin-wall tubes with attached cap / 96 tubes, 20 µl reaction ₩86,000
K-2116 AccuPower® Gold Multiplex PCR PreMix, 0.2ml thin-wall tubes with attached cap / 480 tubes, 20 µl reaction ₩344,000
K-2117 AccuPower® Gold Multiplex PCR PreMix, 0.2ml thin-wall tubes with attached cap / 96 tubes, 50 µl reaction ₩130,000
K-2118 AccuPower® Gold Multiplex PCR PreMix, 0.2ml thin-wall tubes with attached cap / 480 tubes, 50 µl reaction ₩517,000




















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