AccuPower® HotStart PCR PreMix

AccuPower® HotStart PCR PreMix는 바이오니아의 enzyme-mediated HotStart 특허기술을 적용하여 반응 특이성과 PCR 증폭효율을 높인 제품입니다. 그리고 DNA polymerase, dNTPs, reaction buffer 등 PCR 수행에 필요한 구성성분이 혼합되어 1 회 분량씩 진공 건조되어 있으며, 안정화 물질이 첨가되어 있어 상온 (25°C) 보관할 경우에는 한 달 동안, 냉동 보관 할 경우에는 2년 동안 활성이 안정적으로 유지됩니다.

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카탈로그 번호

개요

(a) Zero cycle에서 PCR 반응 억제
PCR mixture 제조 후, pre-denaturation 온도에 도달하기 전에 비특이적 반응물이 생성되는 것을 방지하기 위해 PPi를 이용합니다.
DNA polymerase가 활성을 갖기 위해서는 Mg2+ 이온이 필요한데, mixture에 첨가되어 있는 PPi는 Mg2+ 이온과 높은 친화력을 갖기 때문에
Mg2+ 이온을 붙잡아 둠으로써 PCR 반응을 억제합니다.


(b) 변성(Denaturation)
Mixture에 첨가되어 있는 PPase는 변성(denaturation) 단계에서 반응 온도가 올라가면 활성화되어 PPi를 Pi로 분해하여 Mg2+ 이온을 해리시킵니다.
해리된 Mg2+ 이온은 DNA polymerase에 결합하여 PCR 반응을 진행할 수 있도록 효소를 활성화 합니다.


(c) 풀림(Annealing) & 증폭(Extension)
활성화된 DNA polymerase는 PCR cycle이 진행됨에 따라 target DNA를 증폭합니다.

특장점

  • 특이성

    차별화된 PyroHotstart 기술은 비특이적 증폭산물 생성을 최소화하고 PCR 반응 효율을 극대화함으로써 미량의 template DNA 를 효과적으로 증폭할 수 있습니다.

  • 민감도

    미량의 DNA 도 뛰어난 특이도와 높은 민감도로 PCR 반응이 가능합니다.

  • 안정성

    PCR 반응 혼합액에 안정화제가 포함되어 있어 상온배송이 가능하고 solution type 제품보다 안정성 뛰어납니다.

  • 편의성

    PyroHotstart 기술로 PCR 조건 선정 시간을 단축시킬 수 있으며 누구나 손쉽게 어려운 template DNA 도 타겟만을 정확히 얻을 수 있습니다.

  • 재현성

    ISO 9001 품질 시스템 하에서 대량 생산되어 lot 간 편차가 최소화 되었으며, 반복적인 실험에도 재현성 있는 실험 결과를 제공합니다.

응용 및 적용

• High specificity PCR

• High sensitivity PCR

• gDNA template PCR

• Low - copy target PCR

• Multiple primer pair PCR

• cDNA template PCR

실험 자료

accupower Figure1

Figure. Specificity comparison between AccuPower® PCR PreMix and AccuPower® HotStart PCR PreMix

Lane 1: P75/P73 primer set (139 bp)
Lane 2: P55/P53 primer set (211 bp)
Lane 3: P55/P63 primer set (447 bp)
Lane 4: P75/P83 primer set (618 bp)
Lane 5: P55/P73 primer ser (1082 bp)
Lane 6: P65/P83 primer set (1296 bp)
Lane 7: P55/P83 primer set (1561 bp)

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