ExiProgen™ EC-Disulfide Protein Synthesis Kit (8 reactions)

ExiProgen™ EC-Disulfide Protein Synthesis Kit는 이황화결합(disulfide bond)를 가지고 있는 목적단백질을 전자동으로 합성할 수 있는 키트입니다. 이황화결합이 9개 있는 단백질도 간편하게 만들 수 있어 세포를 이용한 발현보다 훨씬 효과적으로 사용 하실 수 있습니다.

₩990,000
카탈로그 번호
K-7330





Template DNA를 첨가한 키트를 ExiProgen™에 장착한 후, Protocol no. 905를 가동시키면 단백질 발현/정제 및 투석까지 모든 반응이 전자동으로 이루어지며, 최종 목적 단백질은 Storage buffer에 용해된 상태로 회수할 수 있습니다.

Features and Benefits

Protein Synthesis with disulfide bond
본 키트는 2개 이상의 disulfide bond를 가지고 있는 단백질을 합성하는 데 사용 됩니다.

Fully automatic: DNA-in-Protein (in storage buffer)-out
목적 단백질은 투석버퍼에 용해된 상태로 회수됩니다.

Parallel Processing system
각각의 반응 well 당 최대 50 μg까지의 단백질을 얻을 수 있습니다. 순도는 90% 입니다.


실험 방법 및 원리

본 키트는 일반적인 단백질 발현조건과는 달리 산화환경을 만들어 준 상태에서 진행되며 단백질 발현에 필요한 에너지원 들을 지속적으로 공급해 주는 방법으로 단백질을 발현시킵니다. 발현된 단백질을 Ni-NTA magnetic bead를 이용하여 정제하는 키트입니다.

앞의 그림과 같이 Template DNA를 키트에서 제공하는 E. coli extract와 Master mixture와 함께 섞은 후, 이 반응용액을 반응튜브에 첨가하시기 바랍니다. 그 후 반응튜브를 ExiProgen™의 반응블록에 삽입한 후, 나머지 키트를 장착하고 장비를 가동시키면 됩니다. 본 키트 프로토콜에서 ExiProgen™은 SECF 합성방식으로 전자동으로 단백질을 합성하게 됩니다. 본 키트는 단백질 folding을 돕기 위한 샤페론 단백질이 첨가되어 있고 이황화결합을 갖는 단백질을 합성할 수 있도록 최적의 버퍼조성으로 맞추어져 있습니다.

실험 결과

1. 본 키트로 이황화 결합(Disulfide)을 갖는 단백질을 합성할 수 있으며, 합성된 단백질은 활성을 나타냅니다.


Figure 1. Left Pannel : Expression and purification of ScFV and rtPA.
M: AccuLadder™ Protein Size Marker (Low), 1: ScFv (it has 2 disulfide bonds.), 2: rtPA (it has 9 disulfide bonds)
* Amount of purification sample is 1/40 of total sample. Right panel: rtPA synthesized with ExiProgen™ EC-Disulfide Protein Synthesis Kit has an enzyme activity.
1: Synthesis sample using ExiProgen™ EC-Maxi Protein Synthesis kit.
2: Synthesis sample using ExiProgen™ EC-Disulfide Protein Synthesis kit.
* rtPA activity was measured by incubating with chromogenic substrate S-2288.

Application

본 키트는 항체 스크리닝 등에 응용될 수 있습니다.

키트구성 및 보관온도

본 키트는 두 개의 박스에 포장 되어 배송되며, 각 박스의 구성품은 하기와 같습니다.
Kit 1 Cartridge ① 96 well x 1ea 4℃ 보관
Dialysis tube 1 pack (16 ea/pack)
Disposable filter tip 1 pack (8 ea/pack) 실온보관
Protection cover 1 ea
Kit 2 Cartridge ② 96 well x 1ea -20℃ ~ -70℃보관
E. coli extract 8-tube strip (Yellow) x 1 ea
Master mixture 8-tube strip (Violet)  x 1 ea
DEPC DW 8-tube strip (White)  x 1 ea
Positive control DNA 1.5 ml tube x 1 ea



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K-7330 ExiProgen™ EC-Disulfide Protein Synthesis Kit, 8 rxn ₩990,000 add cart






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